"নতুন করোনারি ভাইরাস নিউমোনিয়া রোগ নির্ণয় এবং চিকিত্সা প্রোগ্রাম (ট্রায়াল নবম সংস্করণ)" বিচ্ছিন্নতা ব্যবস্থাপনা বা স্রাব মুক্তির জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ ভিত্তি হিসাবে নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ Ct মান ≥35 ব্যবহার করে।তাহলে, নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিটের Ct মান কী উপস্থাপন করে?বিভিন্ন কিটের Ct মান কি তুলনাযোগ্য?Ct মান যত কম হবে, কিটের কার্যক্ষমতা তত ভাল হবে?
Ct মান (থ্রেশহোল্ড সাইকেল, Ct) হল PCR চক্রের সংখ্যা যখন রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত ফ্লুরোসেন্স সংকেতের তীব্রতা সেট থ্রেশহোল্ড অতিক্রম করে।নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিটগুলি একটি উদাহরণ হিসাবে নতুন মুকুট গ্রহণ করে।দুটি ভাইরাসযুক্ত নমুনা, A এবং B সনাক্ত করতে একই কিটের একই প্রতিক্রিয়ার জন্য, Ct মানের আকার একটি নির্দিষ্ট পরিমাণে ভাইরাল জিনের অনুলিপির সংখ্যা, অর্থাৎ ভাইরাল লোডকে প্রতিনিধিত্ব করে।নমুনা B-এর Ct যত কম, ভাইরাল লোড তত বেশি।Ct মান ভাইরাল লোড এবং এর সংক্রামকতার বিপরীতভাবে সমানুপাতিক।বিভিন্ন রিয়েল-টাইম ফ্লুরোসেন্স কোয়ান্টিটেটিভ কিটগুলির সুবিধা এবং অসুবিধাগুলি শুধুমাত্র Ct মানের আকার দ্বারা বিচার করা যায় না, কারণ বিভিন্ন কিটের Ct মান তুলনাযোগ্য নয়।সংবেদনশীলতা (ন্যূনতম সনাক্তকরণ সীমা), নির্দিষ্টতা, নির্ভুলতা, স্থায়িত্ব এবং ডায়াগনস্টিক প্রয়োগের দিক থেকে কিটের কার্যকারিতা মূল্যায়ন করা প্রয়োজন।প্রতিটি বিকারক প্রস্তুতকারকের নিজস্ব আঠারো ধরণের মার্শাল আর্ট রয়েছে এবং তাদের প্রয়োগে তাদের নিজস্ব জাদুকরী ক্ষমতা রয়েছে, তাই আমি এখানে বিশদে যাব না।
প্রচলিত রিয়েল-টাইম কোয়ান্টিটেটিভ পিসিআর (QPCR) বিশ্লেষণ যন্ত্র/সিস্টেমের জন্য, Ct মান অর্জন এবং প্যাথোজেন সনাক্তকরণ অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে তাদের ব্যাপক ব্যবহার সবার কাছে পরিচিত।শিল্পের বিকাশ এবং প্রযুক্তির অগ্রগতির সাথে, QPCR সরঞ্জাম এবং বিকারকগুলি সুযোগ এবং চ্যালেঞ্জের মুখোমুখি হয়েছে।Yiou Think Tank (2021 চীনের জেনেটিক টেস্টিং ইন্ডাস্ট্রির গবেষণা প্রতিবেদন: প্রযুক্তি) বিশ্লেষণ করেছে যে আমার দেশের QPCR শিল্পের বেশিরভাগ কোম্পানি প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে সাধারণ সমস্যার সম্মুখীন হচ্ছে।এই সমস্যাগুলির প্রতিক্রিয়া হিসাবে, সমাধানগুলি প্রধানত দুটি প্রকারে বিভক্ত: প্রযুক্তির উন্নতি ত্বরান্বিত করা এবং নতুন প্রযুক্তি স্থাপন করা।
QPCR আণবিক নির্ণয়ের জন্য POCT শিল্পের বিকাশের দিকগুলির মধ্যে একটি, এবং প্রযুক্তির প্রয়োগকে ত্বরান্বিত করার জন্য কর্মক্ষমতার উন্নতি একটি গুরুত্বপূর্ণ কারণ।QPCR-এর একক-নমুনা থ্রুপুট সহ POCT সরঞ্জামগুলির জন্য, R&D-তে একটি একক প্রতিক্রিয়ার মূল প্যারামিটারের Ct মান কীভাবে অপ্টিমাইজ করা যায়?একই যন্ত্রপাতি, একই বিক্রিয়া পদ্ধতি এবং একই টেমপ্লেট ঘনত্ব, তাত্ত্বিকভাবে একটি একক বিক্রিয়ার Ct মান যত বেশি হবে, বিক্রিয়ায় এনজাইমের কার্যক্ষমতা তত কম হবে।
এনজাইম বিক্রিয়ার কার্যকারিতা উন্নত করার এবং Ct মান অপ্টিমাইজ করার প্রক্রিয়ায়, একটি সাধারণ 40 PCR চক্র ফ্লুরোসেন্স পরিমাণগত পরিবর্ধন বক্ররেখা প্রথমে বিশ্লেষণ করা যেতে পারে।নীচের চিত্রে প্রশস্তকরণ বক্ররেখা ফ্লুরোসেন্স ব্যাকগ্রাউন্ড ফেজ, এক্সপোনেনশিয়াল অ্যামপ্লিফিকেশন ফেজ, রৈখিক ফেজ এবং মালভূমি পর্বে বিভক্ত।কম ফ্লুরোসেন্স ব্যাকগ্রাউন্ড অর্জন করার জন্য, যতদূর সম্ভব এটিকে প্রারম্ভিক সূচকীয় পরিবর্ধনের ফ্লুরোসেন্স মান থেকে আলাদা করার জন্য, প্রতিক্রিয়া ব্যবহারযোগ্য বাহক, প্রাইমার প্রোব ডিজাইন স্ক্রীনিং এবং প্রতিক্রিয়া বাফার সিস্টেম থেকে পরীক্ষা করা প্রয়োজন।সূচকীয় পরিবর্ধন সময়কাল এনজাইম কার্যকলাপের সবচেয়ে সরাসরি প্রতিক্রিয়া, এবং এটি POCT সরঞ্জাম, প্রতিক্রিয়া বাহক এবং বিকারকগুলির নিখুঁত সমন্বয়ের প্রমাণ।এই সময়ে, সরঞ্জামের তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ, অপটিক্যাল সংকেত অধিগ্রহণ এবং বিশ্লেষণ, ক্যারিয়ার বায়োকম্প্যাটিবিলিটি, এবং রিএজেন্টগুলির সিস্টেমের কার্যকারিতা সমস্ত দিকগুলিতে সামঞ্জস্য এবং পরীক্ষা করা দরকার।অবশেষে, সম্পূর্ণ পরিবর্ধন সম্পন্ন হয়, এবং একটি যুক্তিসঙ্গত Ct মান পেতে ফলাফলগুলি একটি কঠোর ডেটা অ্যালগরিদম দ্বারা উপস্থাপন করা আবশ্যক।
Ct মান অপ্টিমাইজেশানের একটি ছোট পদক্ষেপ হল R&D কর্মীদের অগণিত পদক্ষেপ।দিনরাত্রির উদ্বেগ ও উত্তেজনার মধ্যে, প্রতিবারই “পাহাড় আর নদী কোথাও দেখা যায় না, উইলো অন্ধকার এবং ফুল উজ্জ্বল এবং আরও একটি গ্রাম আছে”, যা আমাদের এগিয়ে যাওয়ার সাহস এবং আবেগ দেয়। আবার
পোস্টের সময়: সেপ্টেম্বর-২৯-২০২২